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單寧酶(TAN)生化檢測試劑盒

型 號

產品時間2024-11-22

所屬分類氧化與抗氧化系列

報價300

產品描述:單寧酶(TAN)生化檢測試劑盒單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解沒食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和糖。

產品概述

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產品名稱

規格

貨號

單寧酶(TAN)生化檢測試劑盒

100/48 50/24   

EY-01S178

 

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測定意義:

 單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解沒食子單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和糖。

 測定原理: 

使用抗氧化劑沒食子酸丙酯(PG)作為單寧酶酶促反應的底物,在270nn下測定底物PG反應前后的光密度變化,計算單寧酶酶活力。

 需自備的儀器和用品:

 紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽、冰、蒸餾水





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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。


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1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。


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(1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量

(4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。


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